Unidad de citometría de flujo y sorter

Descripción

Es un Servicio de Apoyo a la Investigación (SAI) que realiza citometría de flujo de suspensiones celulares con marcaje de hasta 10 fluorocromos. La citometría de flujo permite obtener información detallada de las características estructurales y funcionales de las células a estudio. La aplicación del Separador Celular (Sorter) permite segregar poblaciones celulares homogéneas, hasta 6 poblaciones, atendiendo a las características analizadas por citometría de flujo.

Las aplicaciones más frecuentes son el conteo celular, el fenotipado de linfocitos, estudio de citocinas, análisis de viabilidad celular, y otras características intracelulares susceptibles de seguimiento mediante marcaje molecular. Es importante remarcar que esta técnica realiza las mediciones célula a célula, más allá de las medidas descriptivas poblacionales. La identificación de marcadores moleculares celulares es de aplicación en la investigación, diagnóstico, seguimiento y tratamiento de muy diversas patologías, por lo que la Citometría de Flujo y Separación Celular es una tecnología implicada en la investigación traslacional.

Este servicio está dirigido a todos los grupos de investigación del Instituto y a centros de investigación, empresas y otras instituciones que lo soliciten.

Servicios ofertados

CITOMETRÍA DE FLUJO ANALIZADOR

  • Asesoramiento y optimización de protocolos de estudio o diseño de experimentos.
  • Análisis de la viabilidad celular a través del marcaje por ioduro de propidio, anexina V o 7-AAD.
  • Análisis del ciclo celular por ioduro de propidio.
  • Análisis de la eficiencia de transfección.
  • Fenotipaje diferentes marcadores linfocitarios en superficie o intracelular.
  • Cuantificación de citocinas solubles en plasma, suero, o sobrenadantes de cultivo a través de un ensayo multiplex (hasta 11 citocinas en 25ul de muestra).
  • Análisis de citocinas intracelulares.
  • Análisis del movimiento del calcio intracelular por marcaje con Fluo-4.
  • Análisis de la activación de la apoptosis a través de la vía de la caspasa-3.
  • Análisis de la apoptosis mediante técnica de TUNEL.
  • Detección de micropartículas a partir de 0.3um, en el sobrenadante de cultivos, plasma, etc…

SEPARADOR CELULAR POR CITOMETRÍA DE FLUJO

  • Clonaje
  • Separación de subpoblaciones
  • Separación de células vivas para cultivo celular.
  • Separación de células fijadas para posterior análisis genético.

SOPORTE AL INVESTIGADOR

  • Formación a demanda y estudio de necesidades de los investigadores.
  • Asesoramiento personalizado sobre abordaje experimental, fluorocromos, marcadores disponibles.
  • Procedimientos normalizados para el mejor procesamiento posible de las muestras.
  • Análisis mediante diversas apliciones informáticas.

TECNOLOGIA CITÓMETRO DE FLUJO 10 COLORES modelo Gallios (Beckman Coulter)

  • Detección de 10 colores. Tres láseres (azul-488nm, rojo-638nm y violeta405nm), controlados desde el ordenador, con sistema de encendido y estabilización rápida.
  • Tubos fotomultiplicadores de última generación, con una alta sensibilidad para el rango del rojo y con excelente linealidad en todo el rango.

CITÓMETRO DE FLUJO SEPARADOR modelo MoFlo Astrios, (BeckmanCoulter)

  • Integración en cabina de seguridad biológica tipo II.
  • Sistema de evacuación de aerosoles y de agitación de la muestra.
  • Temperatura controlada de la muestra (enfriamiento o calentamiento).
  • Posibilidad de hasta 6 láseres de estado sólido (640nm, 592 nm, 561 nm, 532 nm, 488nm, 405 nm) y 7 phinoles. En la actualidad cuenta con 2 láseres (488nm y 640nm).
  • Según la aplicación la velocidad de adquisición puede ser de hasta 100.000cel/seg; autorreconocimiento por fotomultiplicadores (PMT) y PODs que posibilita diferentes configuraciones según el objetivo.
  • Diversos sistemas de recogida: placas multipocillo, tubos de propileno, etc.

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA modelo Eclipse 50i con sistema óptico de Nikon CFI60.