Unidad de biología celular: microscopía y citometria de flujo

Desarrollado por: Instituto de Investigación Sanitaria Fundación Jiménez Díaz

Descripción

Las aplicaciones de la citometría y de la microscopía confocal son muy variadas y abarcan campos tan distantes como estudios de biomedicina, estudios en alimentos o de materiales, etc. Gracias al desarrollo de nuevas sondas fluorescentes y de nuevos sistemas de detección, la diversificación en campos de estudio y nuevas aplicaciones está en continuo crecimiento. En el IIS-FJD, en el campo de la biomedicina se pueden hacer estudios tridimensionales en secciones o en montajes totales, colocalización de sondas fluorescentes, rastreo de moléculas o iones dentro de las células vivas o fijadas, medida de células, orgánulos y determinaciones de volúmenes. 


Las funciones que se realizan en la unidad son: 

  • Mantenimiento y calibración de los equipos del servicio. 
  • Gestión del control de uso de los equipos, de la contabilidad y facturación. 
  • Cursos de formación y supervisión en el uso de los equipos de citometría analítica. 
  • Mantenimiento y distribución de reactivos de uso común en citometría de flujo. 
  • Adquisición de muestras en FACScalibur y FACSCanto. 
  • Análisis de los resultados obtenidos con diferentes software especializados. 
  • Asesoramiento sobre las diversas y complejas técnicas y protocolos, como los fluorocromos más adecuados para los distintos ensayos o los soportes de cultivo para los distintos tipos celulares. 
  • Asesoramiento en la construcción de plantillas para el citómetro de flujo. 
  • Reconstrucción de las imágenes mediante el software multicolor y en 3D. 
  • Enlace entre los investigadores y el servicio de aplicaciones de las casa de los equipos. 


El IIS-FJD dispone de dos citómetros y de dos microscopios confocales Leica, siendo en la actualidad las infraestructuras de carácter institucional más importantes y utilizadas que posee. 

 

Utilidades comunes de la citometría de flujo: 

  • Inmunofenotipo. 
  • Análisis del ciclo celular. 
  • Genes reporteros. 
  • Medida de la proliferación celular. 
  • Apoptosis. 
  • Flujo de calcio. 
  • Señalización intracelular: detección de fosfoproteínas a nivel unicelular. 
  • Ensayos multiplexado de moléculas en disolución.

 

Utilidades en Microscopia Confocal:

  • Colecciones de secuencias seriadas. 
  • Reconstrucciones tridimensionales del objeto estudiado: piel, etc. 
  • Medidas de colocalización de marcadores. 
  • Imágenes laterales del objeto. 
  • Endocitosis.